PDH、α-KGDH、BCKDH 共用五輔酶：TPP、lipoate、CoA、FAD、NAD⁺；lipoate 被 FAD 氧化（不是 NADP）。 TPP 在脫羧反應中攜帶醛基（不是甲基、不是醯基）。 FAD 單次可接 2 個電子 + 2 H⁺（還可半醌態接 1 e⁻）；NAD⁺ 接 2 電子 + 1 H⁺。 Niacin 缺乏 = pellagra（3D：dermatitis、diarrhea、dementia）；Trp 可替代部分需求。 CoA 的活性硫醇來自 β-mercaptoethylamine（cysteamine）；嚴格說不含完整 cysteine。 PLP（B6）參與轉胺、脫羧、消旋；亦結構性支撐 glycogen phosphorylase；ALA synthase 也需 PLP。 Biotin 攜帶 CO₂；四大羧化酶：PC、ACC、PCC、MCC；生蛋白 avidin 結合 biotin 致缺乏。 THF = 6-methylpterin + pABA + glutamate；參與 dTMP、嘌呤、methionine 再生。 B12 唯一含鈷；只微生物能合成；兩活性型 Me-B12（甲硫胺酸合成酶）、Ado-B12（methylmalonyl-CoA mutase）。 惡性貧血 = 自體免疫破胃壁細胞 → 無 IF → B12 不吸收；伴神經症狀（與單純葉酸缺乏的鑑別點）。 Vit C 羥化 Pro/Lys 穩定膠原三股螺旋；缺 → 壞血病。 膽固醇 → 7-脫氫膽固醇 → D3（皮膚）→ 25-OH-D3（肝）→ calcitriol（腎）；作用於 VDR 核受體。 Vit E 含 tocopherols + tocotrienols；chroman + isoprenoid，非醌類；抗氧化。 Vit K 是 isoprenoid/naphthoquinone 衍生物；γ-羧化凝血因子 II/VII/IX/X + Protein C/S；warfarin 抑制 VKOR。 脂溶性維生素 ADEK 需膽汁幫助吸收。 BH4 是人體自製輔酶；PAH、TH、TrpH、NOS 共用；PKU 少數為 BH4 缺陷。 限制酶 Type II 辨識 4–6 bp 迴文序列；迴文判定：反向互補讀等於原序列。 選殖質體必要元素：ori + 抗生素抗性 + MCS；超過 50 kb DNA 要改用 cosmid/BAC/YAC。 Southern（DNA）/ Northern（RNA）/ Western（蛋白）；RFLP 指紋鑑定 → Southern blot。 siRNA 21–23 nt；Cas9 由 gRNA 導引切 DSB，配 NHEJ（敲除）或 HDR（精確編輯）；V(D)J 靠 RAG1/2，與同源重組機制不同。