Gram stain（革蘭氏染色）表面上是染色，實際上是在提醒你細胞包膜的差異。步驟是：結晶紫（crystal violet）＋碘液（iodine）固定 → 酒精脫色 → 沙黃（safranin）復染；留住結晶紫呈紫色的是陽性菌，被脫色後被沙黃染紅的是陰性菌。革蘭氏陽性菌有厚 peptidoglycan，能留住結晶紫；革蘭氏陰性菌 peptidoglycan 薄，外面多了一層 outer membrane（外膜）。這層外膜會影響藥物進入，也帶有 LPS（lipopolysaccharide，脂多醣），所以 G- 敗血症常和發燒、血管擴張、DIC、休克放在一起考。

Vancomycin 難以穿過多數 G- 菌的外膜，因此即使肽聚醣前驅物含有其靶點 D-Ala-D-Ala，臨床上仍不可靠。Lysozyme（存在淚液、黏液）分解 peptidoglycan，對外露厚壁的陽性菌通常較有效。Beta-lactamase（β-內醯胺酶）常位於 G- 的 periplasm（周質空間），可在藥物抵達 PBP 前將其水解。

LPS 三段要背：Lipid A（毒性/致敗血症）＋core polysaccharide＋O antigen（變異最大，用來分同種菌的 serotype 血清型）。

染色題不會只問「紫色或粉紅色」。常見題幹會把形態一起給你：葡萄串狀、鏈狀、桿菌、抗酸染色。下圖先幫你建立視覺直覺；真正作答時仍要回到培養、抗原、NAAT 與臨床情境確認。