檢驗題不要先背儀器名,要先問「測到什麼」。Culture 測活菌,能做 antimicrobial susceptibility testing(藥物敏感性試驗,簡稱藥敏),但慢且受抗生素影響;NAAT/PCR 測核酸,快速且敏感,適合難培養或需要快篩的病原;antigen test(抗原檢測)測病原成分,速度快但敏感度與檢體品質會影響結果;serology 測宿主抗體反應,適合 HBV、HCV、EBV、梅毒等,但急性早期可能還沒 seroconversion(血清轉換)。
同一病原在不同臨床問題會用不同檢驗。例如 HBV 需要 serology 判斷感染狀態與免疫來源,再用 HBV DNA 追蹤 viral load(病毒量);HIV 初篩可用 antigen/antibody combination assay,確診與治療追蹤則看分子檢驗與 viral load;呼吸道病毒常用 multiplex PCR,但陽性不一定等於所有症狀都由它造成。
| 方法 | 測到什麼 | 適合回答 | 例子 |
| Gram stain | 細菌染色與形態 | 初步分類、檢體品質 | G+ cocci clusters vs chains |
| Culture | 活病原 | 菌種與藥敏 | blood culture、urine culture |
| NAAT/PCR | 特定核酸 | 快速、難培養、低量病原 | TB NAAT、GC/CT NAAT、respiratory virus PCR |
| Antigen test | 病原蛋白/多醣 | 快速辨識特定病原 | cryptococcal antigen、urine Legionella antigen、登革 NS1 |
| Serology | 宿主抗體反應 | 感染階段、免疫來源 | HBV panel、EBV、syphilis |
| MALDI-TOF | 蛋白質質譜圖譜 | 培養後快速菌種鑑定 | 臨床微生物實驗室 |
| Sequencing / metagenomics | 病原基因序列 | outbreak、難診斷感染 | encephalitis、culture-negative infection |
PCR、blot 與分子技術(國考高頻)
PCR 特色是快速、高敏感度、檢體使用量少,用於臨床病原核酸檢測;但敏感不等於完美,可能偵測到死菌、殘留核酸或 colonization,也可能因採檢、primer mismatch、抑制物而偽陰性。定量 PCR 可追蹤 viral load(HIV RNA、HBV DNA、HCV RNA)。
Blot 種類是記憶題,用一句口訣分開:Southern=DNA、Northern=RNA、Western=蛋白質、Southwestern=DNA-結合蛋白(以 DNA 探針測 RNA = Northern)。其他常考工具:
| 工具 | 用途 | 陷阱 |
| Blot(Southern/Northern/Western/Southwestern) | 分別偵測 DNA/RNA/蛋白/DNA 結合蛋白 | 口訣分開,別搞反 |
| Ethidium bromide(EtBr) | 插入 DNA 雙股後於 UV 下發螢光,凝膠電泳顯像 | 標準 DNA/RNA 染劑 |
| 限制酶(restriction enzyme) | 辨識並切割特定 DNA 序列(回文位) | 不作用於蛋白或 RNA;是細菌防禦外來 phage DNA 的系統 |
| Sanger(chain-termination)定序 | 需 dNTP+ddNTP(缺 3′-OH 造成鏈終止)+primer+polymerase+模板 | 不需限制酶 |
| 同源重組(homologous recombination) | 由 rec 基因(recA、recBCD) 介導 | 非限制酶/轉位酶/RNA pol |
本節對應國考題 共 40 題 · 隨選 3 題
現場作答這 3 題
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